التيفوئيد
لتعرف على هذا المرض من حيث:
تسمياته الاخرى + تعريف هذا المرض+اسبابه+انتشار العدوى+علامات المرض+المضاعفات+التشخيص+العلاج+الوقايه.....الخ
اليك هذا الرابط
[ندعوك للتسجيل في المنتدى أو التعريف بنفسك لمعاينة هذا الرابط]

اختبار السالمونيلا (اختبار فيدال) (Salmonella Test (Widal Test

نبذة عن بكتيريا السالمونيلا Summary of Salmonella
عصوية short bacilli، سالبة لصبغة جرام Gram negative bacilli،متحرك motile،لا تكون كبسولة non-capsulated.
لبكتيريا السالمونيلا أكثر من 1400 نوع مصلي serotypes بعضها يسبب أمراضاً للإنسان.
لبكتيريا السالمونيلا عدة أجناس أهمها طبياً S. Typhi و S. Paratyphi والتي تسبب الحمى معوية enteric fever
وأنواع S. Typhimurium و S. Enteretidis التي تسبب تسمم غذائي food poisoning والتهاب القولون enterocolitis
ونوع S. Choleraesuis الذي يسبب التسمم للدم septicaemia

الخصائص المصلية Serological characters
تحتوي بكتيريا السالمونيلا على ثلاث أنواع من الأنتجين antigens وهما جسم
البكتيريا somatic الذي يرمز له بـ (O antigen) وعلى السوط flagellar ويرمز
له بـ (H antigen) والكبسولة (المحفظة) capsulate ويرمز لها بـ (K antigen
)

تقاوم هذه البكتيريا الممرضة المناعة الطبيعية بجسم الإنسان وذلك بمنعها
للبلعمة والإلتهام وكذلك بإفراز سم داخلي Endotoxin وقد تفرز سم خارجي
Exotoxine

مبدأ الاختبار المصلي
الاختبار يجرى بطريقة اللاتكس Latex Method وهي طريقة حساسة إلى حد كبير
إذا تم إجراء الاختبار تحت الظروف المناسبة ويتم التراص بالطريقة
المباشرةDirect Agglutination
ومبدأ الاختبار هو إضافة الأنتيجينات Reagent بعد معاملتها صناعياً إلى
الأجسام المضادة في مصل المريض سيُحدث تراص Agglutination واضح بالعين
المجردة.
طريقة التراص في الأنابيب أفضل من طريقة التراص على شريحة اللاتكس لكن
سهولة وسرعة أجراء اللاتكس (الشريحة) وأيضاً قلة التكلفة جعلته هو السائد
عند الكثير من البلدان التي يستوطن فيها هذا المرض.

• لابد من ملاحظة البروزون Prozone في النتائج السلبية من الاختبار حيث
أنها من الممكن أن تعطي نتائج سلبية كاذبةFalse Negative وذلك بسبب وجود
نسبة عالية من الأجسام المضادة في المصل ما يحُدث التنافس على الارتباط مع
الأنتيجينات Reagent وبالتالي لا يحدث التراص الواضح ، ولتجنب ذلك عمل
الاختبار بتخفيف العينة Dilution of Sample حتى تقل كمية الأجسام المضادة
في المصل وبالتالي يعطي نتائج جيدة وواضحة.

اختبار فيدال Widal Test
في هذا الاختبار يتم البحث عن الأجسام المضادة الخاصة بالسالمونيلا من نوع
IgG و IgM في مصل Serum المريض، ويتميز هذا الاختبار بسهولة عمله وحساسيته
إذا تم عمل الاختبار بطريقة التخفيف Dilution، واختبار فيدال هو للأنواع S.
Typhi و S. Paratyphi فقط أم بقية الأنواع فمن الأفضل الكشف عنها بطريقة
الزراعة في معمل المايكروبيولوجي ، وكما ذكرت سابقاً فأن الاختبار يبحث عن
الأجسام المضادة المتكونة من دخول الأنتيجينات لجسم المصاب وأهم هذه
الأنتيجينات O antigen (جسم البكتيريا somatic) و H antigen (سوط البكتيريا
flagellar).
لهذه الأنتيجينات عدة أنواع مهماً طبياً لذلك لابد من الكشف عنها باختبار فيدال وهي:
لـ O antigen أربعة أنواع هي OA و OB و OC و OD
لـ H antigen أربعة أنواع هي HA و HB و HC وHD

طريقة عمل اختبار Widal Test procedure1.

اولا تحضر جميع المحاليل Reagents وعينات المرضى (مصل Serum) على درجة حرارة الغرفة.

ثانيا يوضع 20 ميكروليتر من Positive control في
الحجرة الأولى Well على شريحة اللاتكس و 20ميكروليتر من Negative control
في الحجرة الثانية وذلك من أجل المقارنة بعد خروج نتائج الاختبار مع
الكنترول والتأكد من أن المحاليل Reagents سليمة وصالحة للاستخدام.

ثالثا يستخدم 8 حجرات لكل عينة (يوجد 8 أنواع من الأنتجين) وذلك بوضع 20 ميكروليتر من المصل Serum في كل حجرة Well.

رابعا تمزج محاليل اللاتكس المحتوية على
الأنتيجينات لكل أنواع السالمونيلا الثمانية بالتقليب ثم تؤخذ 40
ميكروليتر(قطرة واحدة Drop) منه إلى كل حجرة المحتوية على مصل المريض.

خامسا تمزج Mix بشكل دائري باستخدام الأعواد المناسبة.


سادسا توضع شريحة اللاتكس على الهزاز Shaker
لمدة 1-3 دقائق يظهر التراص تحت ضوء مناسب ولا تؤخذ نتيجة بعد هذا الوقت
لأن بدء جفاف العينة قد يؤدي إلى ظهور ايجابية كاذبة Positive False.

النتيجه:

• (+) : حدوث تراص Agglutination (Ab-Ag Reaction)***
• (-) : عدم حدوث تراص Non Agglutination (Ab-Ag Non Reaction)

*** في حالة حدوث تراص Agglutination لابد من عمل التخفيف للعينة Dilution of Sample :

• يفضل عمل التخفيف في أنابيب Tubes ويوضع في كل أنبوب 100 ميكروليتر من
الـ Normal Saline ويوضع في الأنبوب الأول 100 ميكروليتر من عينة المصل
Serum وتمزج وينقل إلى الأنبوب الثاني 100 ميكروليتر وهكذا إلى آخر أنبوب
في أنابيب التخفيف بعد ذلك ينقل من كل أنبوب 100 ميكروليتر إلى الحجرات في
شريحة اللاتكس ويضاف المحلول Reagents على كل الحجرات Wells .
• يتم تسجيل آخر تخفيف ظهر فيه التفاعل إيجابي (+) كنتيجة نهائية للاختبار (قد تختلف مقدار وطريقة التخفيف من شركة مصنعة لأخرى).
.
.
.

هذا الموضوع منقول للاهميه


للمزيد>

للمزيد>