تقنية pcr

موضوع: تقنية pcr الثلاثاء يونيو 08, 2010 12:11 am

[center]هي تقنية مخبرية
تم اكتشافهاعام 1983 تقوم على اكثار نسخ DNA خارج النظام الحيوي او هي
طريقة لنسخ DNA في المختبر
متطلباتPCR:-
جهاز التحكم بدرجات الحرارة للتفاعل بشكل دقيق ومتتالي(Thermocycle) يقوم
الجهاز بتغير درجة الحرارة بشل سريع
البليمريز:هو الانزيم الذي يقوم ببناء وترتيب القواعد النتروجينية ويجب ان
يكون هذا الانزيم مقاوم للحرارة العالية ليتمكن من العمل

مجموعة متفرقة من القواعد النتروجينية (ATCG) ليتمكن الانزيم من ترتيبها في
موقعها اثناء عملية نسخ الحمض النووي
البريمر(Primer):وهو قطعة صغيرة من الحمض النووي DNA ليتمكن الانزيم من بدء
البناء والنسخ عليه[والشئ الاهم وهو وجود نسخة من الحمض النووي المراد
نسخها ]بالاضافة الى محلول او وسط ليتم التعامل به التفاعل و هذا المحلول
يختلف منل لاخر
طريقة العمل :-
يوضع الحمض النووي المراد نسخه مع البريمر وانزيم البليمريز ومجموعة
الاحماض النووية في انبوب داخل جهاز التحكم الحراري يمر هذا الانبوب
بثلاث مراحل وهي:-
مرحلة التفكيك(Denature) هي مرحلة لفك الحمض النووي في درجة حرارة 94
وزمنها دقيقة واحدة
[مرحلة الالتصاق(Anneal) :-
هي مرحلة انزال الحرارة الى مابين 55_60 وتستغرق زمن قدره 5ثواني ليقوم
البريمر بالالتصاق فزيائيا بواسطة الروابط الهيدروجينيه مع الحمض النووي
الاصل DNA
مرحلة الامتداد (Extend):-
هي مرحلة رفع درجة الحراره الى 75 ليقوم البلمريز بعمله في بناء الحمض
النووي الجديدوتستغرق 2دقيقة
تطبيقات PCR ]
الكشف اعن الطفرات الوراثية
تعيين البصمة الوراثية
الكشف عن الفيروسات
هو العنصر الاهم في عملية التجمييع الجيني
معرفة طول الحمض النووي
تقنية الحمض النووي
انواع PCR:-
normal PCR وهوالذي تم شرحة سابقا
Real time PCRويكون مرتبط بجهاز كمبيوترلتحديد الوقت الحقيقي لبدا التفاعل
ومن ثم الكمية الحقيقية لعدد نسخ

[/center]

» تقنية الخزف المضغوط
» تقنية الأوترنت outer net
» تقنية صيانة الطرق
» تقنية الكليبسو لطلاء الجدران‎
» تقنية التصوير بالتعريض الطويل.. كيف تعمل ؟